细胞增殖实验服务

细胞增殖是由细胞生长和分裂的正常健康过程产生的细胞数量的增加。在这方面,细胞增殖可以是一般细胞健康的良好指标。经受各种疾病状态的细胞可能表现出与正常细胞不同的增殖率。因此,测量不同细胞群体之间的细胞增殖率可以提供对这些细胞相对健康的了解。测量细胞增殖率的方法包括MTT, WST-1, BrdU, PCNA 还有CCK8实验。

 

细胞增殖图片

细胞是我们身体的结构和功能单位,控制和维持所有单细胞和多细胞生物的功能。细胞增殖和分化的过程从胚胎发育到从单细胞或双细胞胚胎发育为整个生物体起着关键作用,并且通过用新细胞回收旧细胞继续其维持成体组织匀浆稳定的关键作用。此外,异常细胞增殖也与癌症等人类疾病有关。总之,细胞增殖测定法在体外和体内条件下仔细检查细胞增殖速率是非常重要的。

 

我们能够基于几个概念进行不同的细胞增殖测定,这些概念包括测量DNA复制速率,分析代谢活性,细胞表面抗原识别,检测增殖标记,ATP测量,膜完整性测量等。

创造性生物芯片细胞增殖分析的优势

  • 灵活:我们根据客户的细胞类型和要求选择合适的检测方法。
  • 准确:所获得的数据与细胞数目密切相关。
  • 敏感:能够检测低细胞数量。
  • 快速:高吞吐量,快速周转时间。
  • 可交付成果:剂量反应曲线和IC 50值。

不同的细胞增殖测定技术在这里可用

  • DNA合成细胞增殖分析
    • 原理:增殖细胞将3H-胸苷/ BrdU标记掺入其新生DNA中,可将其洗涤,粘附于滤膜上,然后测量。
    • 染料标签:3H-胸苷,BrdU
    • 特点:传统方法,可靠
    • 应用:适用于免疫组织化学,免疫细胞化学,细胞内ELISA,流式细胞仪分析和高通量筛选。
  • 代谢细胞增殖测定
    • 原理:可以使用基于细胞群代谢活性的细胞增殖测量。四唑盐或Alamar Blue是在代谢活性细胞的环境中被还原的化合物,形成甲dye染料,随后改变培养基的颜色,这是由增殖期间酶乳酸脱氢酶的活性增加引起的。含有培养基的染料溶液的吸收可以使用分光光度计或微板读数器以低通量或高通量配置读取。
    • 染料标签:MTT,XTT,MTS,WST1,WST8
    • 特征:用于细胞增殖测定的成熟方法,高通量
  • 检测增殖标记
    • 原理:测量细胞增殖的另一种方法是使用针对抗原的单克隆抗体来检测增殖细胞中存在的抗原,但不检测非增殖细胞。
    • 抗原:Ki-67,PCNA(增殖细胞核抗原),拓扑异构酶IIB和磷酸化组蛋白H3。
    • 特点:高通量,适用于检测体内肿瘤细胞增殖。
  • 测量[ATP]
    • 原理:当细胞开始凋亡或失去膜完整性时,ATP储备通过ATP酶的活性耗尽,同时阻止任何新的ATP合成。在ATP存在的情况下,萤光素酶产生光(与ATP浓度成比例),其可以通过发光计或任何能够读取发光信号的酶标仪来检测。
    • 酶:萤光素酶
    • 特点:高通量细胞增殖分析和筛选。
  • 跟踪新的RNA合成
    • 原理:检测新合成的RNA是测量细胞增殖和毒理学分析的重要方法。5-乙炔基尿苷(EU)可用于检测新合成的RNA。
    • 底物:5-乙炔基尿苷(EU)
    • 特点:简单的程序。
  • 基于荧光的细胞增殖测定
    • 原理:荧光细胞内标记可用于活细胞的增殖分析。标记的细胞可以使用流式细胞术和荧光显微镜来分析。染料持久且很好地保留在标记的细胞内。
    • 荧光染料:CFSE
    • 特点:高通量,足够~1000次测定。
  • 膜完整性测量
    • 原理:基于膜完整性测量的所有测定都依赖于细胞膜的分解,以允许大分子进入细胞,或允许细胞内蛋白质分泌到培养基中。
    • 底物:LDH,台盼蓝,钙黄绿素-AM,碘化丙锭/ 7-AAD

 

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