抗氧化/自由基检测技术服务

自由基是含有未成对电子的原子、分子或原子团。它是线粒体在电子传递的过程中产生的,正常情况下,机体的自由基清除系统可使自由基的产生与消除保持在极低的动态平衡水平上,对机体是有利的。但当体内蓄积过量自由基时,就会损伤细胞,导致动物组织或细胞的氧化损伤。

抗氧化剂是抑制或淬灭自由基反应并延迟或抑制细胞损伤的分子。1虽然抗氧化防御因物种而异,但抗氧化防御的存在是普遍存在的。抗氧化剂在细胞内和细胞外环境中以酶和非酶形式存在。
正常的生化反应,增加的环境暴露以及更高水平的膳食异生素导致产生活性氧(ROS)和活性氮物种(RNS)。 ROS和RNS负责不同病理生理条件下的氧化应激。3我们身体的细胞成分在氧化应激条件下发生改变,导致各种疾病状态。通过增强抗氧化剂形式的细胞防御可以有效地中和氧化应激。4,5某些化合物在体内起作用抗氧化剂通过提高内源性抗氧化防御水平。编码酶的基因的表达如超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)增加内源性抗氧化剂的水平。6

抗氧化剂可以以多种方式分类。根据它们的活性,它们可以归类为酶和非酶抗氧化剂。酶促抗氧化剂通过分解和去除自由基起作用。在存在辅助因子如铜,锌,锰和铁的情况下,抗氧化酶将危险的氧化产物转化为过氧化氢(H 2 O 2),然后转化为水。非酶抗氧化剂通过中断自由基链反应起作用。很少有非酶抗氧化剂的例子是维生素C,维生素E,植物多酚,类胡萝卜素和谷胱甘肽。7

分类抗氧化剂的另一种方法是基于它们在水或脂质中的溶解度。抗氧化剂可分为水溶性和脂溶性抗氧化剂。水溶性抗氧化剂(例如维生素C)存在于细胞液中,例如胞质溶胶或细胞质基质。脂溶性抗氧化剂(例如维生素E,类胡萝卜素和硫辛酸)主要位于细胞膜中。

抗氧化剂也可根据其大小,小分子抗氧化剂和大分子抗氧化剂进行分类。小分子抗氧化剂在称为自由基清除的过程中中和ROS并将其带走。该类别的主要抗氧化剂是维生素C,维生素E,类胡萝卜素和谷胱甘肽(GSH)。大分子抗氧化剂是酶(SOD,CAT和GSHPx)和牺牲蛋白(白蛋白),它们吸收ROS并防止它们攻击其他必需蛋白质。

要了解抗氧化剂的作用机理,有必要了解自由基的产生及其破坏性反应。本综述详细阐述了自由基产生和产生的损害,天然抗氧化剂化合物的作用机理以及评价其抗氧化性能的方法。讨论了抗氧化剂测定的反应机理。本文的范围仅限于天然抗氧化剂和用于评估其抗氧化性质的体外试验。

实验流程:
1. 从血液或组织中提取超氧化物歧化酶(SOD);
2. 设置测定管和对照管,加入相应的试剂;
3. 混匀,37℃恒温水浴30min;
4. 加入显色剂;
5. 吸光度检测;
6. 根据公式计算SOD活力。

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